技术服务

AI驱动质谱技术 聚焦精准医疗

蛋白质 N- 糖基化、O- 糖基化位点与糖型分析

百蓁生物采用优化的完整糖肽质谱分析技术,和特有的PEAKS GlycanFinder 糖蛋白质组质谱数据分析软件,可以对复杂样品的完整糖肽进行鉴定和相对定量分析,包括糖基化位点,糖型分析,糖结构分析,提供糖基化修饰的全局视角, 也可以超越糖数据库以外,对糖肽的糖链修饰进行从头测序分析。

服务介绍

在众多的蛋白质翻译后修饰中,糖基化是最常见的、也是最复杂的翻译后修饰之一,蛋白的糖基化在细胞信号传导、宿主 - 病原体相互作用、免疫反应等特定生物过程中发挥着至关重要的作用[1],因此糖基化位点及该位点糖型分析具有十分重要的意义。

百蓁生物采用优化的完整糖肽质谱分析技术,和特有的PEAKS GlycanFinder 糖蛋白质组质谱数据分析软件,可以对复杂样品的完整糖肽进行鉴定和相对定量分析,包括糖基化位点,糖型分析,糖结构分析,提供糖基化修饰的全局视角, 也可以超越糖数据库以外,对糖肽的糖链修饰进行从头测序分析。


技术流程

服务优势

1.直接检测糖肽,无需切糖;

2.直接鉴定糖基化位点,无需标记;

3.可以提供每个糖基化位点的糖型分布以及相对含量比例的统计;

4.样本之间糖基化非标定量分析;

5.可以同时完成糖基化蛋白中N-糖基化位点与糖型定性定量的分析和糖基化蛋白中O-糖基化位点与糖型定性定量的分析。

6.我们的服务可以准确的分析目标蛋白中糖基化位点所对应的糖型,检测灵敏度高,准确性好。

a. 文献最新报道使用血液纯化后的抗体样本鉴定到了22种糖型[2],基于同样的样本我们的流程鉴定到31种糖型(下图所示),糖型的鉴定数目有40%的提升比例;

表 | 人血液样品中糖型鉴定的结果

b. 我们的流程可以明显的区分不同抗体亚型的糖基化(下图所示),已报道的研究结果对个别IgG抗体类型是区分不开的或鉴定不到[3];



 |  IgG 不同亚型的糖基化


应用领域

抗体与重组蛋白质类药物的糖基化表征和生产质控

样品要求及交付标准

  送样要求

蛋白样品≥100 ug,纯度90%以上(SDS-PAGE);提供蛋白质氨基酸序列。

项目周期

14个工作日

交付标准

出具正式报告,报告提供抗体所有的糖基化位点、糖肽位点特异性信息或寡糖结构以及糖型的定量等信息。


参考文献

1. Watanabe Y, Allen JD, Wrapp D,et al. Site-specific glycan analysis of the SARS-CoV-2 spike.Science,2020, 369:330-333.

2. Liu S, Fu Y, Huang Z,et al. A comprehensive analysis of subclass-specific IgG glycosylation in colorectal cancer progression by nanoLC-MS/MS.Analyst, 2020, 145(8):3136-3147.

3. Momčilović A, de Haan N, Hipgrave Ederveen AL, et al. Simultaneous Immunoglobulin A and G Glycopeptide Profiling for High-Throughput Applications.Anal Chem, 2020, 92(6):4518-4526