随着PEAKS AB 3.0软件升级，百蓁生物推出蛋白“从头测序（De novo Sequencing）+深度聚糖全景分析(Glycan Profiling)”的服务，可以对抗体重链和轻链中鉴定的N-糖基化位点进行深入的聚糖分析。除了精确的糖肽映射到组装的抗体序列之外，基于酶的聚糖谱学分析显示了在选定的糖基化位点上每个聚糖的组成和相对丰度。在每个糖肽谱中提供了聚糖组成和结构注释，并基于N-糖数据库匹配聚糖片段离子。

图1 | 从头测序技术流程

图2 | Glycan Profiling界面展示

糖基化修饰占到所有PTM（Post-translational Modification，翻译后修饰）的50%以上，对于治疗性蛋白药物（如重组蛋白药物、抗体药物），糖基化修饰通过影响免疫原性、半衰期、效应因子等，进而影响其安全性和有效性，如表1所示。

表1 | 几种糖基化结构对抗体效能的影响

Batra J, Rathore AS. 2016 Sep;32(5):1091-1102.

ADCC: antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity；CDC: complement dependent cytotoxicity

抗体药物的糖基化形式主要为N-糖基化，涉及的单糖主要包括：葡萄糖、半乳糖、甘露糖、N-乙酰葡糖胺、N-乙酰半乳糖胺、岩藻糖、唾液酸（NANA、NGNA）。

图3 | 单抗中常见的N-糖结构

抗体的糖基化结构与培养条件之间存在着复杂的关系。已知宿主细胞类型、培养基和培养过程参数等均对糖基化产生显著影响。这些信息为生产的早期决策提供了信息，并且是质量控制和ICH Q6B标准的一部分。

图4 | 多种培养参数影响哺乳动物细胞糖基化

①温度；②谷氨酰胺浓度；③溶解氧；④葡萄糖水平；⑤氨离子；⑥细胞系（野生型或工程型）；⑦细胞活力；⑧锰离子；⑨丁酸钠；⑩核苷酸糖；⑪二甲基亚砜；⑫pH

服务优势 

准：抗体/蛋白序列100%准确

全：抗体/蛋白从头测序和糖基化的分析一步到位，解析生物药更全面的信息；

强：强大的糖肽解析能力，如发现CDR区域的关键糖基化修饰等；

深：深入发现每一个糖基化位点，提供基于位点的糖型结构及比例。

应用场景

1、抗体发现过程中糖型的监测

2、抗体药物结构和糖型的改造